PCR con transcriptase inversa: Diferenzas entre revisións
Contido eliminado Contido engadido
m Correcciones ortográficas con Replacer (herramienta en línea de revisión de errores) |
Sen resumo de edición |
||
Liña 2:
[[Ficheiro:RT-PCR gl.svg|miniatura|Esquema simple da RT-PCR.]]
A '''reacción en cadea da polimerase con transcritase inversa''' (ou '''PCR tras transcritase inversa'''), abreviada como '''RT-PCR''' (do inglés ''reverse transcriptase PCR'') é unha das moitas variantes da [[reacción en cadea da polimerase]] (PCR) na que previamente se realiza unha [[reversotranscrición]]. Esta técnica úsase comunmente en bioloxía molecular para detectar a expresión do [[ARN]].<ref name="pmid9894600">{{Cita publicación periódica |author=Freeman WM, Walker SJ, Vrana KE |title=Quantitative RT-PCR: pitfalls and potential |journal=[[BioTechniques]] |volume=26 |issue=1 |pages=112–22, 124–5 |date=January 1999 |pmid=9894600 |doi= }}</ref> A PCR con transcritase inversa (RT-PCR) confúndese a miúdo coa [[PCR en tempo real]] ou cuantitativa (qPCR), que ás veces tamén se ve abreviada como RT-PCR (''real time'').<ref name="Mackay, Ian 2007 440">{{Cita libro |author=Mackay, Ian |title=Real-time PCR in Microbiology: From Diagnosis to Characterization |publisher=Caister Academic Press |location=Norfolk, England |year=2007 |pages=440 |isbn=1-904455-18-2 |oclc= |doi= |accessdate=}}</ref> Porén, son técnicas distintas. A PCR con reversotranscritase (RT-PCR) utilízase para detectar cualitativamente a [[expresión xénica]] por medio da creación dun [[ADN complementario]] (ADNc) reversotranscrito a partir dun [[ARN]], mentres que, ao contrario, a [[qPCR]] úsase para medir cuantitativamente a amplificación dun [[ADN]] usando [[sonda de hibridación|sondas]] fluorescentes<ref name="Mackay, Ian 2007 440"/><ref name="pmid14706621">{{Cita publicación periódica |author=Radonić A, Thulke S, Mackay IM, Landt O, Siegert W, Nitsche A |title=Guideline to reference gene selection for quantitative real-time PCR |journal=[[Biochemical and Biophysical Research Communications]] |volume=313 |issue=4 |pages=856–62 |date=January 2004 |pmid=14706621 |doi= 10.1016/j.bbrc.2003.11.177|url=http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0006291X03025646 |accessdate=2012-11-06}}</ref> en tempo real.<ref name="pmid11846609">{{Cita publicación periódica |author=Livak KJ, Schmittgen TD |title=Analysis of relative gene expression data using real-time quantitative PCR and the 2(-Delta Delta C(T)) Method |journal=[[Methods (biomedical journal)|Methods]] |volume=25 |issue=4 |pages=402–8 |date=December 2001 |pmid=11846609 |doi=10.1006/meth.2001.1262 |url=http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S1046-2023(01)91262-9 |accessdate=2012-11-06}}</ref>
Tamén hai que distinguor entre a RT-PCR e a [[PCR|PCR tradicional]]. Aínda que a PCR con transcritase inversa (RT-PCR) e a PCR tradicional producen ambas moitas copias dun ADN particular illado por amplificación, as aplicacións das dúas técnicas son moi distintas. A PCR tradicional utilízase para amplificar exponencialmente [[secuencia de ADN|secuencias de ADN]] dianas. A RT-PCR utilízase para clonar xenes expresados por [[reversotranscrición]] do ARN de interese a un ADN complementario por medio do uso do encima [[transcritase inversa]]. Seguidamente, o que se fai é que ese ADNc sintetizado novamente é amplificado usando a PCR tradicional.
| |||