Secuenciación de escopeta: Diferenzas entre revisións

Contido eliminado Contido engadido
Miguelferig (conversa | contribucións)
Miguelferig (conversa | contribucións)
Liña 155:
 
Because it involves first creating a low-resolution map of the genome, hierarchical shotgun sequencing is slower than whole-genome shotgun sequencing, but relies less heavily on computer algorithms than whole-genome shotgun sequencing. The process of extensive BAC library creation and tiling path selection, however, make hierarchical shotgun sequencing slow and labor-intensive. Now that the technology is available and the reliability of the data demonstrated,<ref name="venter" /> and the speed and cost efficiency of whole-genome shotgun sequencing has made it the primary method for genome sequencing.
-->
 
== Secuenciación de seguintexeraciónseguinte xeración ==
A secuenciación de escopeta clásica estaba b aseada no método de secuenciación de Sanger: esta foi a técnica máis avanzada para a secuenciación de xenomas aproximadamente durante o período 1995–2005. A estratexia de escopeta ou ''shotgun'' aínda se aplica hoxe en día; porén, usando outras tecnoloxías de secuenciación, chamadas [[secuenciación do ADN#Métodos de seguinte xeración|se uenciación de seguinte xeración]]. Estas tecnoloxías producen lecturas máis curtas (de aproximadamente 25–500 pares de bases), pero moitos milleiros ou millóns de lecturas nun tempo relativamente curto (da orde dun día).<ref>{{cite journal
The classical shotgun sequencing was based on the Sanger sequencing method: this was the most advanced technique for sequencing genomes from about 1995–2005. The shotgun strategy is still applied today, however using other sequencing technologies, called [[DNA sequencing#Next-generation methods|next-generation sequencing]]. These technologies produce shorter reads (anywhere from 25–500bp) but many hundreds of thousands or millions of reads in a relatively short time (on the order of a day).<ref>{{cite journal
| last = Karl
| first = V
Liña 168:
| pmid = 19246620
| doi = 10.1373/clinchem.2008.112789 |display-authors=etal}}</ref>
Isto ten como resultado unha alta cobertura, pero o proceso de ensamblaxe require un uso máis intensivo da computación. Estas tecnoloxías son moi superiores á secuenciación de Sanger debido ao alto volume de datos e o tempo relativamente curto que se tarda en secuenciar un xenoma completo.<ref>{{cite journal
This results in high coverage, but the assembly process is much more computationally intensive. These technologies are vastly superior to Sanger sequencing due to the high volume of data and the relatively short time it takes to sequence a whole genome.<ref>{{cite journal
| last = Metzker
| first = Michael L.
Liña 183:
 
== Secuenciación de escopeta metaxenómica ==
 
Having reads of 400-500 base pairs length is sufficient to determine the species/strain of the organism where the DNA comes from, provided its genome is already known, by using for example a [[K-mer#Applications_of_k-mer_in_bioinformatics_analysis|k-mer based]] [[Taxonomy_(biology)#Classifying_organisms|taxonomic classifier]] software. With millions of reads from next generation sequencing of an environmental sample, it is possible to get a complete overview of any complex microbiome with thousands of species, like the [[gut flora]]. Advantages over 16S rRNA [[amplicon sequencing]] are: not being limited to bacteria; strain-level classification where amplicon sequencing only gets the genus; and the possibility to extract whole genes and specify their function as part of the metagenome.<ref>{{cite journal
Ter lecturas de 400-500 pares de bases é dabondo para determinar a especie/cepa do organismo do cal procede o ADN, con tal qe o seu xenoma sexa xa coñecido, usando por exemplo un software de clasificación taxonómica [[K-mer|baseado en k-mer]]. Con millóns de lecturas da secuenciación de seguinte xeración de mostras ambientais, é posible ter unha visión completa de calquera microbioma complexo con miles de especies, como a [[flora intestinal]]. As vantaxes sobre a [[secuenciación de amplicón]] de [[ARNr de 16S]] son: non está limitado a bacterias; clasificación ao nivel de cepas, onde a secuenciación amplicón só o fai a nivel de xénero; e a posibilidade de extraer [[xene]]s completos e especificar as súas funcións como parte do metaxenoma.<ref>{{cite journal
| last1 = Roumpeka
| first1 = Despoina D.
Liña 196 ⟶ 197:
| doi = 10.3389/fgene.2017.00023
}}</ref>
TheA sensitivitysensibilidade ofda metagenomicsecuenciación sequencingmetaxenómica makesfaina itunha anelección attractiveatractiva choicepara foro clinicaluso useclínico.<ref>{{cite journal
| last1 = Gu
| first1 = Wei
Liña 209 ⟶ 210:
| doi = 10.1146/annurev-pathmechdis-012418-012751
}}</ref>
ItPorén, howeverenfatiza emphasizeso theproblema problemda ofcontaminación contaminationda ofmostra theou samplea orpipeline thede sequencing pipelinesecuenciación.<ref>{{cite journal
| last1 = Thoendel
| first1 = Matthew
Liña 223 ⟶ 224:
| doi = 10.1128/JCM.02402-16
}}</ref>
-->
 
== Notas ==