Secuenciación do ADN: Diferenzas entre revisións
Contido eliminado Contido engadido
m →Ligazóns externas: Arranxos varios + cda |
m Arranxos varios, replaced: {{cite web → {{Cita web (5) |
||
Liña 36:
O [[secuenciación de Sanger|método de terminación de cadea]] desenvolvido por Frederick Sanger e colaboradores en 1977 axiña se converteu no método preferido de secuenciación debido á súa relativa simplicidade e fiabilidade.<ref name="Sanger1977">{{Cita publicación periódica |author=Sanger F, Nicklen S, Coulson AR |title=DNA sequencing with chain-terminating inhibitors |journal=Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.|volume=74 |issue=12 |pages=5463–7 |year=1977 |pmid=271968 |pmc=431765 |doi=10.1073/pnas.74.12.5463 |bibcode = 1977PNAS...74.5463S}}</ref><ref name=Sanger75>{{Cita publicación periódica |author=Sanger F, Coulson AR |title=A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase |journal=J. Mol. Biol. |volume=94 |issue=3 |pages=441–8 |year=1975 |pmid=1100841 |doi=10.1016/0022-2836(75)90213-2}}</ref> O método de terminación de cadea usaba menos compostos tóxicos e menor cantidade de radioactividade que o método de Maxam e Gilbert. Debido á súa comparativa sinxeleza, o método de Sanger foi axiña automatizado e foi o método utilizado pola primeira xeración de [[secuenciador de ADN|secuenciadores de ADN]].
A secuenciación de Sanger é o método que prevaleceu desde a década de 1980 ata mediados da década do 2000. Nese período, fixéronse grandes avances na técnica, como o etiquetado fluorescente, a [[electroforese capilar]], e a automatización xeral. Estas melloras permitían unha secuenciación moito máis efeiciente, o que reduciu os seus custos. O método de Sanger, aplicado masivamente, é a tecnoloxía coa que se obtivo o [[Proxecto Xenoma Humano|primeiro xenoma humano]] en 2001, marcando o comezo da idade da [[xenómica]]. Porén, avanzada a década, chegaron ao mercado técnicas con estratexias totalmente diferentes, que rebaixaron o custo por xenoma desde uns 100 millóns de dólares en 2001 a só 10.000 en 2011.<ref>{{
== Métodos avanzados e secuenciación ''de novo'' ==
Liña 85:
! Método !! Secuenciación en tempo real dunha soa molécula (Pacific Bio) !! Ión semicondutor (secuenciación de Ion Torrent Systems) !!Pirosecuenciación (454) !! Secuenciación por síntese (Illumina) !! Secuenciación por ligazón (secuenciación SOLiD) !! Terminación de cadea (secuenciación de Sanger)
|-
| '''Lonxitude de lectura''' ||2900 [[par de bases|bp]] de media<ref name=autogenerated1>{{
|-
| '''Precisión''' ||87% (en modo de lonxitude lida), 99% (en modo exactitude)|| 98%|| 99.9% || 98% || 99.9% || 99.9%
Liña 171:
== Métodos en desenvolvemento ==
Actualmente hai varios métodos de secuenciación do ADN que están en desenvolvemento, como o da ADN polimerase etiquetada,<ref>{{
As tecnoloxías de terceira xeración pretenden incrementar o rendemento e diminuír o tempo para obter os resultados e o custo ao eliminaren a necesidade de usar excesivos reactivos e aproveitar a [[procesividade]] da [[ADN polimerase]].<ref>{{Cita publicación periódica|last=Schadt|first=E.E.|autor2=S. Turner, A. Kasarskis|title=A window into third-generation sequencing|journal=Human Molecular Genetics|year=2010|volume=19|issue=R2|pages=R227–40|doi=10.1093/hmg/ddq416|pmid=20858600}}</ref>
| |||