Diferenzas entre revisións de «ADN recombinante»

Na maioría dos casos, os organismos que conteñen ADN recombinante teñen aparentemente [[fenotipo]]s normais. É dicir, a súa aparencia, comportamento e [[metabolismo]] non quedan normalmente cambiados e o único modo de demostrar a presenza de secuencias recombianntes é examinar o propio ADN, normalmente usando un test de [[PCR]].<ref name="isbn1-4051-1121-6">{{cite book |author=Brown, Terry |title=Gene Cloning and DNA Analysis: an Introduction |publisher=Blackwell Pub |location=Cambridge, MA |year=2006 |pages= |isbn=978-1-4051-1121-8 |oclc= |doi= }}</ref> Hai tamén excepcións significativas, que se discuten máis abaixo.
 
Se as secuencias de ADN recombinante codifican un xene que se expresa, entón pode detectarse a presenza de ARN e/ou produtos proteicos do xene recombinante, xeralmente usando as técnicas da [[RT-PCR]] ou do [[western blot]].<ref name="isbn1-4051-1121-6"/> Os cambios fenotípicos grandes non son o normal, a non sderser que o xene recombinante fose elixido e modificado para xerar unha actividade biolóxica no organismo hóspede.<ref name="pmid|10634784">{{Cite journal
| last1 = Ye | first1 = X.
| last2 = Al-Babili | first2 = S.
| pmid = 10634784 | doi=10.1126/science.287.5451.303
| bibcode = 2000Sci...287..303Y
}}</ref> Os fenotipos adicionais que se poden encontrar son toxicidadetoxicidades no organismo hóspede inducidainducidas polo produto recombinante, especialmente se este é sobreexpresado ou expresado en células ou tecidos inapropiados.
 
Nalgúns casos, o ADN recombinante pode ter efectos deletéreosprexudiciais incluso se non é expresado. Un mecanismo polo cal pode ocorrer isto é a [[Inserción (xenética)|inactivación inseccional]], na cal o ADN recombinante queda inserido nun xene da célula hóspede. Nalgúns casos, pode utilizarse este fenómeno para facer un [[knockout de xenes]] para determinar a súa función biolóxica e importancia.<ref name="pmid1591000">{{Cite journal
| last1 = Koller | first1 = B. H.
| last2 = Smithies | first2 = O.
| pmid = 1591000
| pmc =
}}</ref> Outro mecanismo polo cal a inserción do ADN recombinante no ADN cromosómico pode afectar á expresión xénica é pola inactivaciónactivación inapropiada de xenes da célula hóspede que previamente non se expresaban. Isto pode acontecer, por exemplo, cando un fragmento de ADN recombinante que contén un promotor activo queda localizado pretotdunpreto dun xene da célula hóspede previamente silencioso ou cando un xene da célula hóspede que funciona restrinxindo a expresión xénica sofre unha inactivación insercional polo ADN recombinante.
 
== Usos ==
190.202

edicións