Electroforese en xel bidimensional: Diferenzas entre revisións

Contido eliminado Contido engadido
Miguelferig (conversa | contribucións)
Miguelferig (conversa | contribucións)
Liña 22:
O fresultado disto é un xel con proteínas espalladas pola súa superficie. Estas proteínas poden detectarse por diversos medios, pero o que máis se usa é a tinguidura con [[tinguidura de prata|prata]] e [[Azul Brillante Coomassie]]. No primeiro caso, aplícase o xel un [[coloide]] de prata. A prata únese a grupos [[cisteína]] a proteína. A prata escurécese ao expoñela a [[luz ultravioleta]]. A cantidade de prata pode relacionarse coa escuridade que presente o xel e, por tanto, a cantidade de proteína nunha determinada localización do xel. Esta medida pode dar só cantidades aproximadas, pero é adecuada para a maioría dos propósitos. A tinguidura de prata é 100 veces máis sensible que a de Azul Brillante Coomassie cun rango de linearidade 40 veces maior.<ref>{{cite journal |author=Switzer RC 3rd, Merril CR, Shifrin S |title=A highly sensitive silver stain for detecting proteins and peptides in polyacrylamide gels |journal=Analytical Biochemistry |year=1979 |volume=98 |pages=231–37 |pmid=94518 |doi=10.1016/0003-2697(79)90732-2 |issue=1}}</ref>
 
Outras moléculas distintas das proteínas poden tamén separarse por electroforese 2D. En ensaios de [[superenrolamento do ADN|superenrolamento]], o [[ADN]] enrolado é separado na primeira dimensión e desnaturalizado por medio dun intercalador do ADN (como o [[bromuro de etidio]] ou a menos [[carcinóxeno|carcinóxena]] [[cloroquina]]) na segunda dimensión. Isto é comparable á combinación de PAGE nativa/SDS-PAGE na separación de proteínas.
 
== Técnicas comúns ==