Citotoxicidade: Diferenzas entre revisións
Contido eliminado Contido engadido
Liña 10:
== Medición ==
Os ensaios de citotoxicidade son amplamente utilizados pola industria farmacéutica para facer exames de citotoxicidade en bibliotecas compostas. Os investigadores poden buscar compostos citotóxicos, se están interesados no desenvolvemento dunha terapéutica que se dirixe contra as células cancerosas en rápida división, por exemplo; ou poden examinar os "golpes" ("hits") dos exames iniciais de fármacos de alto rendemento polos efectos
A avaliación da integridade da [[membrana plasmática]] é unha das formas máis comúns de medir a viabilidade celular e os efectos citotóxicos. Os compostos que teñen efectos citotóxicos a miúdo comprometen a integridade da membrana celular. As tinguiduras vitais, como o [[trypan azul]] ou ioduro de propidio son excluídos normalmente desde o interior das células sas; porén, se a membrana plasmática se viu comprometida, cruzan libremente a membrana e tinguen compoñentes intracelulares.<ref name="riss1"/> Alternativamente, a integridade da membrana pode ser avaliada monitorizando o paso de substancias que normalmente son secuestradas dentro da célula ao exterior das mesmas. A molécula [[lactato deshidroxenase]] (LDH) está medida comunmente usando un [[ensaio de LDH]]. A LDH reduce o [[NAD]]<sup>+</sup> a [[NADH]], que provocar un cambio de cor pola interacción cunha proba específica.<ref>{{cite journal |author=Decker T, Lohmann-Matthes ML |title=A quick and simple method for the quantitation of lactate dehydrogenase release in measurements of cellular cytotoxicity and tumor necrosis factor (TNF) activity |journal=J. Immunol. Methods |volume=115 |issue=1 |pages=61–9 |date=November 1988 |pmid=3192948 |doi= 10.1016/0022-1759(88)90310-9|url=|last2=Lohmann-Matthes }}</ref> Os biomarcadores de [[protease]] permiten medir a cantidade relativa de células vivas e mortas dentro dunha mesma poboación celular. A protease das células vivas só é activa nas células que teñen unha membrana plasmática sa, e perde a actividade unha vez que a célula está comprometida e a protease queda exposta ao ambiente extracelular. A protease das células mortas non pode cruzar a membrana plasmática, e só pode medirse no medio de cultivo despois de que as células perderon a integridade da súa membrana.<ref>{{cite journal |vauthors=Niles AL, Moravec RA, Eric Hesselberth P, Scurria MA, Daily WJ, Riss TL |title=A homogeneous assay to measure live and dead cells in the same sample by detecting different protease markers |journal=Anal. Biochem. |volume=366 |issue=2 |pages=197–206 |date=July 2007 |pmid=17512890 |doi=10.1016/j.ab.2007.04.007 }}</ref>
| |||