ELISA: Diferenzas entre revisións

Contido eliminado Contido engadido
Miguelferig (conversa | contribucións)
Miguelferig (conversa | contribucións)
Liña 50:
*Canto maior é a concentración do anticorpo primario presente no soro, máis forte é o cambio de cor. Xeralmente utilízase un espectrómetro para dar os valores cuantitativos da forza da cor.
 
O encima actúa como un amplificador, xa que as moléculas de encima producirán moitas moleculasmoléculas sinal aínda que só permanezan unidos uns poucos anticorpos ligados a encima. Coas limitación de sentido común, o encima pode continuar producindo cor indefinidamente, pero cantomáis anticorpo haxa unido, máis rápido se producirá a cor. Unha importante desvantaxe do ELISA directo é que o método de inmobiliación do antíxeno non é esècífico; canso se usa soro sanguíneo como fonte de antíxeno, todas as proteínas da mostra pode adherirse ao pozo da placa microtitradora, polo que pequenas concentracións de analito no soro deben competir con outras proteínas do soro á hora de unirse á superficie dopozo. O ELISAindirecto ou sandwich dá unha solución a este problema, ao usar un anticorpo de "captura" específico para o antíxeno que vai ser comprobado para retiralo da mestura molecular do soro.
 
O ELISA pode realizarse en formato cualitativo ou cuantitativo. Os resultados cualitativos proporcionan un simple resultado positivo ou negativo (de si ou non) para a mostra. O límite para discernir entre un positivo e un negativo é determinado polo analista e pode ser estatístico. A miúdo utilízase un límite que está en dús ou tres veces a desviación típica (erro inherent nunha prob) para distinguir entre mostras positivas e negativas. No ELISA cuantitativo, a densidade óptica da mostra compárase cunhacurva estándar, que é normalmente unha dilución seriada dunha solución de concentración coñecida da molécula diana. Por exemplo, se unha proba dunha mostra dá unha densidade óptica de 1,0, opunto na curva estándar que dá unha densidade óptica de 1,0 debe ter a mesma concentración de analito que a mostra.