ELISA: Diferenzas entre revisións
Contido eliminado Contido engadido
Sen resumo de edición |
Sen resumo de edición |
||
Liña 4:
O '''ELISA''', siglas do inglés '''''enzyme-linked immunosorbent assay''''' ('''ensaio de inmunoabsorbencia de encima ligado''') é unha técnica de laboratorio que utiliza [[anticorpo]]s e cambios de cor para identificar unha substancia.
ELISA é un formato moi común de ensaio bioquímicoanalítico do tipo ''laboratorio húmido'' (''wet-lab''), que utiliza un '''[[inmunoensaio]] encimático''' ('''EIA''') en fase sólida para detectar a presenza dunha substancia, xeralmente un [[antíxeno]], nnha mostra líquida ou mostra
O ELISA foi utilizado como ferramenta para o [[diagnóstico médico]] e en [[patoloxía de plantas]], e como unha comprobación do [[control de calidade]] en varias industrias.
Liña 12:
A realización dun ELISA implica normalmente utilizar polo menos un anticorpo con especificidade para un determinado antíxeno. A mostra que contén unha cantidade indeterminada de antíxeno é inmobilizada sobre un soporte sólido (xeralmente unha [[placa microtitradora]] de [[polistireno]]) que pode ser capturado non especificamente (por medio de [[adsorción]] á superficie) ou ben especificamente (por medio de captur por outro anticorpo específico do mesmo antíxeno, nun ELISA "sandwich"). Unha vez que o antíxeno é inmobilizado, engádese o anticorpo de detección, formando un complexo co antíxeno. O anticorpo de detección pode ser enlazado [[covalente]]mente a un [[encima]], ou pode el mesmo ser detectado por un [[anticorpo secundario]], que está enlazado a un encima por [[bioconxugación]]. Entre un paso e o seguinte, a placa é normalmente lavada cunha solución [[deterxente]] suave para eliminar calquera [[proteína]] ou anticorpo que non se unira especificamente. Despois do último paso de lavado, a placa desenvólvese engadindo un substrato encimático para producir un sinal visibe, que indica a cantidade de antíxeno na mostra.
Hai que sinalar, que coa técnica ELISA poden realizarse tamén outras formas de [[ensaios de unión de ligandos]] e non só ''inmuno''ensaios, aínda que o nome leva o orixinal "immuno" debido ao uso común e á historia do desenvolvementodeste método. A técnica require esencialmente un axente ligante calquera que poida ser inmobilizado na fase sólida xunto cun axente de detección que se una especificamente e usa un encima para xerar un sinal que poida ser identificado axeitadamente. Entre lavado e lavado, só o [[ligando]] e a molécula á que se une especificamente permanecen unidos ou "inmunoadsorbidos" polas interaccións antíxeno-anticorpo á fase sólida, mentres que os compoñentes non específicos ou non unidos son arrastrados polo lavado. A diferenza doutros formatos de ensaios de ''laboratorio húmido'' espectrofotométricos no que pode reutilizarse o mesmo pozo de reacción (por exemplo unha cubeta) despois
== Principios ==
| |||