Clonación: Diferenzas entre revisións
Contido eliminado Contido engadido
m →Clonación celular: ligazón máis específica |
|||
Liña 8:
A clonación de calquera secuencia de ADN inclúe os seguintes pasos:
* [[Fragmentación xenética|Fragmentación]]: inicialmente, o ADN de interese precisa ser fragmentado para prover un segmento relevante de ADN dun bo tamaño. A preparación dos fragmentos para a clonación obtense frecuentemente do [[PCR]], pero tamén pode facerse por medio da [[dixestión xenética|dixestión]] con [[enzima de restrición|enzimas de restrición]] e ás veces fraccionando con [[electroforese
* [[Ligazón]]: un procedemento de ligazón emprégase cando o fragmento amplificado se insire nun [[vector biolóxico|vector]]. Dito vector (que xeralmente é circular) convértese nunha secuencia lineal utilizando enzimas de restrición, e é incubado co fragmento de interese baixo as condicións apropiadas cunha enzima chamada [[ADN ligasa]].
* [[Transfección]]: despois da ligazón, o vector co xene de interese transfírese a unha [[célula]]. Comunmente utilízase a [[electroporación]], aínda que existe un gran número de técnicas alternativas.
| |||