Southern blot: Diferenzas entre revisións
Contido eliminado Contido engadido
Liña 27:
# A membrana é entón quentada ao baleiro nun forno de baleiro ou normal a 80 °C durante 2 horas (en condicións estándar, con nitrocelulosa ou membrana de nailon) ou é exposta a [[radiación ultravioleta]] (con membrana de nailon) para que o ADN transferido quede unido permanentemente á membrana.
# A membrana é despois exposta a unha sonda de hibridación, que é un fragmento de ADN monocatenario cunha secuencia específica cuxa presenza no ADN diana debe determinarse. A sonda de ADN está etiquetada para que poida detectarse, xeralmente incorporándolle marcaxe [[radioactividade|radioactiva]] ou [[fluorescencia|fluorescente]] ou unha [[hibridación in situ cromoxénica|tinguidura cromoxénica]]. Nalgúns casos, a sonda de hibridación pode ser de ARN en vez de ADN. Para segurar a especificidade da unión da sonda ao ADN da mostra, os métodos de hibridación máis comúns usan ADN de esperma de [[salmón]] ou de [[arenque]] para bloquear a superficie da membrana e o ADN diana, [[formamida]] desionizada, e [[deterxente]]s como o [[dodecil sulfato sódico|SDS]] para reducir a unión non específica da sonda.
# Despois da hibridación, lávase o exceso de sonda da membrana (normalmente usando [[tampón SSC]]), e o patrón de hibridación visualízase
== Resultados ==
|