Southern blot: Diferenzas entre revisións

Contido eliminado Contido engadido
Miguelferig (conversa | contribucións)
Miguelferig (conversa | contribucións)
Liña 35:
 
== Aplicacións ==
A transferencia de Southern pode utilizarse para a clonación baseada na homoloxía da secuencia de aminoácidos do produto proteico do xene diana. Os [[oligonucleótido]]s están deseñados de modo que sonsexan similares á secuencia diana. Os oligonucleótidos son sintetizados quimicamente, radioetiquetados, e usados para examinar unha [[libraría de ADN]], ou outras coleccións de fragmentos de ADN clonados. As secuencias que se hibridan coa sonda de hibridación son analizadas, por exemplo, para obter a secuencia completa do xene diana.
 
Segundo, oO Southern blot pode tamén usarse para identificar os sitios [[metilación|metilados]] en xenes determiandos. Son especialmente útiles as nucleases de restrición ''MspI'' e ''HpaII'', que ambas as dúas recoñecen e clivan (cortan) dentro da mesma secuencia. Porén, ''HpaII'' require que a [[citosina|C]] dentro dese sitio estea metilada, mentres que a ''MspI'' cliva só ADN non metilado nese sitio. Por tsantotanto, calquera sitio metilado dentro desa secuencia analizada cunha sonda particular será clivada polo primeiro encima, pero non polo último. <ref>Biochemistry 3rd Edition, Matthews, Van Holde et al, Addison Wesley Publishing, pg 977</ref>
 
== Notas ==