Southern blot: Diferenzas entre revisións

Contido eliminado Contido engadido
Miguelferig (conversa | contribucións)
Miguelferig (conversa | contribucións)
Liña 35:
 
== Aplicacións ==
A transferencia de Southern pode utilizarse para a clonación baseada na homoloxía da secuencia de aminoácidos do produto proteico do xene diana. Os [[oligonucleótido]]s están deseñados que son similares á secuencia diana. Os oligonucleótidos son sintetizados quimicamente, radioetiquetados, e usados para examinar unha [[libraría de ADN]], ou outras coleccións de fragmentos de ADN clonados. As secuencias que se hibridan coa sonda de hibridación son analizadas, por exemplo, para obter a secuencia completa do xene diana.
Southern transfer may be used for homology-based cloning on the basis of amino acid sequence of the protein product of the target gene. [[Oligonucleotides]] are designed that are similar to the target sequence. The oligonucleotides are chemically synthesised, radiolabeled, and used to screen a [[DNA library]], or other collections of cloned DNA fragments. Sequences that hybridise with the hybridisation probe are further analysed, for example, to obtain the full length sequence of the targeted gene.
SecondSegundo, o Southern blottingblot canpode alsotamén beusarse usedpara toidentificar identifyos methylatedsitios sites[[metilación|metilados]] inen particularxenes genesdetermiandos. ParticularlySon usefulespecialmente areútiles the restrictionas nucleases de restrición ''MspI'' ande ''HpaII'', bothque ofambas whichas recognizedúas andrecoñecen cleavee withinclivan the(cortan) samedentro sequenceda mesma secuencia. HoweverPorén, ''HpaII'' requiresrequire thatque a [[citosina|C]] withindentro thatdese sitesitio beestea methylatedmetilada, whereasmentres que a ''MspI'' cleavescliva only DNAADN unmethylatednon atmetilado thatnese sitesitio. ThereforePor tsanto, anycalquera methylatedsitio sitesmetilado withindentro adesa sequencesecuencia analyzedanalizada withcunha asonda particular probeserá willclivada bepolo cleavedprimeiro by the formerencima, butpero notnon the latter,polo enzymeúltimo.<ref>Biochemistry 3rd Edition, Matthews, Van Holde et al, Addison Wesley Publishing, pg 977</ref>
 
== Notas ==