A configuración en dobre hélice do ADN fai que as súas dúas febras sexan difíciles de separar, pero deben ser separadas polas [[helicase]]s para que outros encimas poidan realizar a [[transcrición xenética|transcrición]] das [[secuencia de ADN|secuencias de ADN]] que codifican as [[proteína]]s, ou a [[replicación do ADN]]. No [[ADN circular]], como o das bacterias[[bacteria]]s ou as mitocondrias[[mitocondria]]s, as dúas fibras están topoloxicamente ligadas, ou ''[[teoría do nó|anoadas]]''. Doutro modo unsUns bucles idénticos de ADN con diferente número de xiros, son [[topoisómero]]s, e non poden ser interconvertidos por ningún proceso que non requira que se rompan as febras do ADN. As topoisomerases catalizan e guían o desanoamento ou destorcemento do ADN<ref>C.Michael Hogan. 2010. [http://www.eoearth.org/articles/view/158858/?topic=49496 ''Deoxyribonucleic acid''. Encyclopedia of Earth. National Council for Science and the Environment.] eds. S.Draggan and C.Cleveland. Washington DC</ref> ao crearen roturas transitorias no ADN utilizando unha [[tirosina]] conservada como residuo catalítico.<ref name="pmid11395412"/>
A inserción do ADN viral nos cromosomas e outras formas de [[recombinación xenética|recombinación]] poden tamén requirir a acción de topoisomerases.
