Rato knockout: Diferenzas entre revisións
Contido eliminado Contido engadido
Liña 44:
Hai variabilidade en todo o procedemento dependendo principalmente da liña a partir da cal se derivaron as [[célula nai|células nais]] ou troncais. En xeral, úsanse as células derivadas da liña 129. Esta liña específica non é axeitada para moitos experimentos (por exemplo, os estudos de comportamento), polo que é moi común facer [[retrocruzamento]]s da proxenie con outras liñas. A algúns [[loci]] xenómicos é moi difícil aplicarlles o knockout. As razóns disto poden ser a presenza de secuencias repetitivas, extensa [[metilación do ADN]], ou de [[heterocromatina]]. Denomínase "efecto dos xenes flanqueantes" a confusión causada pola presenza de xenes veciños do 129 no segmento knockout de material xenético. <ref name="pmid8723200">{{cite journal |author=[[Robert Gerlai|Gerlai R]] |title=Gene-targeting studies of mammalian behavior: is it the mutation or the background genotype? |journal=[[Trends (journals)|Trends in Neurosciences]] |volume=19 |issue=5 |pages=177–81 |year=1996 |month=May |pmid=8723200 |doi= 10.1016/S0166-2236(96)20020-7|url=http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0166223696200207 |accessdate=2010-03-07}}</ref> Propuxéronse métodos e directrices para enfrontarse a este problema.<ref name="pmid12079755">{{cite journal |author=Wolfer DP, [[Wim Crusio|Crusio WE]], Lipp HP |title=Knockout mice: simple solutions to the problems of genetic background and flanking genes |journal=Trends in Neurosciences |volume=25 |issue=7 |pages=336–40 |year=2002 |month=July |pmid=12079755 |doi= 10.1016/S0166-2236(02)02192-6|url=http://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0166223602021926 |accessdate=2010-03-07}}</ref><ref name="pmid18778401">{{cite journal |author=Crusio WE, Goldowitz D, Holmes A, Wolfer D |title=Standards for the publication of mouse mutant studies |journal=[[Genes, Brain and Behavior|Genes, Brain, and Behavior]] |volume=8 |issue=1 |pages=1–4 |year=2009 |month=February |pmid=18778401 |doi=10.1111/j.1601-183X.2008.00438.x |url=http://www3.interscience.wiley.com/resolve/openurl?genre=article&sid=nlm:pubmed&issn=1601-1848&date=2009&volume=8&issue=1&spage=1 |accessdate=2010-03-07}}</ref>
Outra limitación é que os ratos knockout convencionais (é dicir, non condicionais) desenvólvense en ausencia do xene investigado. Ás veces, a perda de actividade do xene durante o desenvolvemento embrionario pode enmascarar o papel do xene no estado adulto. Requírense entón enfoques
Outra seria limitación é a ausencia de adaptacións evolutivas no modelo knockout que poderían aparecer nos animais de tipo salvaxe por mutacións naturais. Por exemplo, a coexpresión específica dos
==Notas==
| |||